应用PCR法检测向日葵茎溃疡病菌的研究

• 作者: 刘彬 张祥林 王文正 王翀 陈燕
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 向日葵茎溃疡病菌 PCR 体系优化
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 页码范围: 470-476
• 分类号: S435.655
• 字数: 4101字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2012.03.011

摘要

[目的]设计出向日葵茎溃疡病菌(Phomopsis helianthi M.Muntanola - Cvetkovic)的特异性引物,建立该病菌PCR快速检测方法.[方法]用真菌通用引物ITS4/ITS5对向日葵茎溃疡病菌进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆、酶切分析和测序,用DNAMAN软件设计出检测该病菌的特异性引物PHDF1和PHDF2,优化PCR反应体系.[结果]PCR反应体系为:25 mM MgCl2 2.4 μL,10 mM dNTP 0.3 μL,10 uM引物各1.5 μL,模板7 ng,最佳退火温度61.6C,建立了该病菌PCR检测方法.[结论]应用该方法检测供试的13个菌株,该对引物可以准确的将向日葵茎溃疡病菌与其他拟茎点霉属的真菌区分开来,该病菌的PCR扩增片段为326 bp.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张祥林		65	571	13.0	21.0
2	王翀		28	109	6.0	9.0
3	刘彬		4	33	3.0	4.0
7	陈燕		4	33	3.0	4.0
11	王文正		4	15	2.0	3.0