PEP-1-CAT抑制氧化应激条件下大鼠骨髓间充质干细胞的凋亡

• 作者: 唐俊明 孔霞 张蕾 杨建业 王家宁 董小伟 郑飞 郭凌郧
• 来源期刊: 湖北医药学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: PEP-1肽 过氧化氢酶 骨髓间充质干细胞 氧化应激 细胞凋亡 线粒体膜电位
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 285-291,封3
• 页数: 8页
• 分类号: R34
• 字数: 6397字
• 语种: 中文

摘要

目的:研究PEP-1-CAT融合蛋白转导人大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenehymal stem ceils,MSC)的能力,以及其预处理对MSC在氧化应激损伤条件下凋亡的影响及其机制.方法:采用流式细胞仪检测MSC表面标记物CD29、CD90、CD45、CD34,并检测成脂肪细胞和成骨细胞的诱导分化能力.采用免疫荧光染色和Western blot检测融合蛋白His-CAT和His-PEP-1-CAT转导入MSC的能力.DAPI染色和流式细胞仪检测细胞的凋亡率,采用相应的试剂盒分别检测丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性的改变和线粒体膜电位的变化.结果:MSC低表达CD34(1.78％)、CD45(1.41％),高表达CD29 (94.3％)、CD90( 95.5％),具有成脂、成骨多向分化的潜能.PEP-1 -CAT转导人MSC中呈现时间和剂量依赖性特征,而His-CAT不能进入细胞内.与His-CAT组相比较,PEP-1-CAT融合蛋白预处理组MSC的凋亡率明显降低,LDH和MDA含量明显下降,减轻了因氧化应激引起的线粒体膜电位的下降.结论:PEP-1-CAT融合蛋白通过清除活性氧,维持线粒体膜电位的稳定,显著抑制了MSC在氧化应激损伤情况下的凋亡.