应用多重SYBR Green—I实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高梁花叶病毒

• 作者: 刘志昕 张雨良 熊国如 王健华 王洪星 章绍延
• 来源期刊: 热带农业科学
• 学科: 医学
• 关键词: 甘蔗黄叶病毒 高梁花叶病毒 SYBR Green—I实时荧光PCR 病毒检测
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 环境与植物保护
• 页码范围: 52-56,62
• 页数: 6页
• 分类号: R383.24
• 字数: 1686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2196.2012.07.013

摘要

基于已报道的甘蔗黄叶病毒（SugarcaneYellowLeafVirus．SCYLV）cp基因和高粱花叶病毒（Sorghummosaicvirus．SrMV）NSP基因序列设计特异性引物．建立了针对这两种病毒的实时荧光定量PCR（re矗time-quantitative，RT-qPCR）检测方法。在此基础上，利用扩增产物‰值的不同，建立了可区分ScYLV与SrMV的多重SYBRGreen—I实时荧光定量PCR方法．两种病毒扩增产物的‰值分别为80．8～82．8℃和84．6～86．6℃。检测数据显示：SrMV和ScYLV均有各自的特异性峰值出现，而健康植株无特异性峰值；在单独检测中的检出水平分别可达500和250copy／ixL：两种病毒m值的批内变异系数分别为0．03％和0．0270．批间变异系数分别为2．0670和3．1270。综上所述．所建立的多重SYBRGreen—I实时荧光定量PCR方法在对以上两种病毒的检测中具有较好的特异性、敏感性和稳定性。