桑树原生质体分离条件的优化试验

• 作者: 崔为正 王洪利 王海朋 羿德磊 袁传忠
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 桑树 原生质体 分离材料 酶液组合 渗透压调节剂 酶解温度 酶解时间
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 204-209
• 分类号: S888.2
• 字数: 5777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2012.02.004

摘要

为了分离获取高产量、高活力的桑树原生质体,分别以桑树的组培苗细切叶片、胚性悬浮培养细胞、粗切愈伤组织和细切愈伤组织等为材料,采用正交试验和单因素试验的方法对桑树原生质体酶解分离条件中的分离酶液组合、渗透压调节剂、酶解温度、酶解时间等因素进行优化.最佳分离酶液组合为100 U/mL纤维素酶R-10+ 150 U/mL果胶酶Y-23+6 U/mL离析酶R-10+细胞-原生质体洗液(1 480 mg/L CaCl2 ·2H2O,27.2 mg/L KH2PO4),以0.6 mol/L甘露醇为渗透压调节剂,在28℃酶解温度条件下酶解6h,用桑树胚性悬浮培养细胞作分离材料可获得7.8×106个/g的原生质体产量,且原生质体活力达91.4％.研究结果显示,选择合适的分离材料以及酶解分离条件是高效获取高活力桑树原生质体的关键.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪利	山东农业大学林学院农业生态与环境重点实验室	36	392	10.0	19.0
2	崔为正	山东农业大学林学院农业生态与环境重点实验室	107	913	18.0	25.0
3	王海朋	山东农业大学林学院农业生态与环境重点实验室	6	26	2.0	5.0
4	羿德磊	山东农业大学林学院农业生态与环境重点实验室	5	12	2.0	3.0
5	袁传忠	山东农业大学林学院农业生态与环境重点实验室	5	10	2.0	3.0