刀额新对虾精氨酸激酶基因的克隆与真核表达

• 作者: 刘群英 吴静 尤春霞 邬敏辰 郑海军 陈伟
• 来源期刊: 中国海洋药物
• 学科: 医学
• 关键词: 对虾 精氨酸激酶 基因 重组 真核表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R915|R96
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆刀额新对虾精氨酸激酶的基因并进行真核表达.方法 提取刀额新对虾总RNA,经逆转录获得精氨酸激酶的cDNA,插入质粒pPIC9K构建重组真核表达质粒,转化毕赤酵母进行诱导表达,用SDS-PAGE和斑点免疫分析鉴定重组表达产物.结果 逆转录获得的精氨酸激酶cDNA全长1071bp,DNA序列分析结果与GenBank收录的序列(EU497674)比较,同源性为99.5％；重组表达质粒转化酵母的表达产物经SDS-PAGE分析,其相对分子质量约40 kD;表达产物与虾过敏者血清呈较强反应性.结论克隆得到刀额新对虾的精氨酸激酶基因并获得其重组真核表达产物,为进一步研制虾类食物过敏症的相关检测试剂提供了试验依据.