(鱼师)鱼诺卡氏菌SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 刘璐 李思源 王国良
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: (鱼师)鱼诺卡氏菌 SYBR-GreenⅠ 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 页码范围: 509-513
• 分类号: S941.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2012.27624

摘要

根据GenBank中(鱼师)鱼诺卡氏菌16S-23S rRNA基因序列设计并合成一对特异性引物,经反应体系优化后建立了检测(鱼师)鱼诺卡氏菌的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法.结果显示,该方法线性关系良好,标准曲线的相关系数为0.998;溶解曲线分析显示产物为单一的特异峰；检测灵敏度可达10-6 μg/μL的DNA含量,与嗜水气单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、麦氏弧菌不发生交叉反应,具有良好的特异性.应用建立的方法在(鱼师)鱼诺卡氏菌病爆发时期,对16份鱼体组织、养殖水体、饲料等样品进行了检测,结果7份为阳性,与细菌分离、培养检查结果100％相符.既能检测发病鱼,又能检出未发病且已感染的病鱼,对病害的早期防控体现应用价值.结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量等优点,可用于鱼类致病(鱼师)鱼诺卡氏菌的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王国良	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	143	2150	27.0	39.0
2	刘璐	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	12	79	5.0	8.0
3	李思源	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	6	68	5.0	6.0