神经生长因子在雄鸡睾丸组织中的定量表达

• 作者: 张映 李丽芳 李桂兰 郝玉娟
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 神经生长因子 睾丸 雄鸡 发育过程 实时荧光定量 PCR
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 517-522,509
• 页数: 7页
• 分类号: Q344+.5
• 字数: 4334字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2012.06.008

摘要

为探讨神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)在雄鸡睾丸组织中的表达情况.分别取20 w、24 w、28 w、35 w龄雄鸡睾丸组织,一部分经冻存处理后采用Trizol试剂提取Total RNA.根据GenBank中已公布的原鸡NGF基因序列,利用Primer 5.0设计合成特异性引物,通过两步法RT-PCR扩增出NGF基因片段,然后利用实时荧光定量PCR以β-actin为内参基因进行相对定量分析.另一部分经冻存处理后用RIPA组织裂解液提取总蛋白进行Western blot分析.结果显示两步法RT-PCR扩增出的NGF基因片段经电泳检测为219 bp,符合预期片段大小,与GenBank中登录的鸡NGF基因比对,同源性达99%;NGF基因在不同周龄雄鸡睾丸组织中的mRNA表达水平表现为:性成熟发育期(20 w-28 w)雄鸡睾丸组织NGF mRNA的表达量随鸡龄的增加呈上升趋势,且28 w达到高峰,成年期(35 w)有所下降.Western blot检测到NGF的蛋白表达量随各发育阶段呈增加趋势,在20 w龄前,蛋白表达量处于较低水平,在进入睾丸迅速发育期 (20 w-28 w) 后,表达量大幅度增加,在35 w基本达到峰值.提示 NGF mRNA 的表达随着睾丸组织的发生、发育呈现一定的变化规律,且NGF在睾丸组织的发育及精子的发生等阶段起到重要的调节作用,从而为后续研究NGF在禽类生殖系统中的作用提供一定的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李桂兰	山西农业大学动物科技学院	14	44	5.0	6.0
2	张映	山西农业大学动物科技学院	99	842	13.0	24.0
3	李丽芳	山西农业大学信息学院	10	28	3.0	5.0
4	郝玉娟	山西农业大学动物科技学院	1	2	1.0	1.0