蓝藻抗病毒蛋白-N衍生物的克隆、发酵与纯化

• 作者: 吴崇超 姚冬生 杨依丽 杨辉 熊盛 罗勇 陈伟 陈佳
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 工学
• 关键词: 蓝藻抗病毒蛋白-N 连接肽 发酵 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 116-120
• 分类号: TQ936.2
• 字数: 3554字
• 语种: 中文

摘要

蓝藻抗病毒蛋白-N( Cyanovirin-N,CVN)能特异性与病毒表面糖蛋白结合,抑制病毒进入宿主细胞及抑制病毒感染细胞与未感染细胞的融合.通过分子设计及优化,在CVN的N-末端连接了5个氨基酸的柔性多肽(GGGGS),构建了SUMO-L5-CVN融合表达系统.SUMO-L5-CVN在大肠杆菌BL21中呈可溶性表达；通过表达条件优化,以0.5 mmol/L IPTG在20℃诱导24h 是最佳的诱导表达条件；SUMO-L5-CVN表达量占菌体总蛋白的30％；经Ni-NTA亲和层析获得融合蛋白SUMO-L5-CVN,SUMO蛋白酶酶切,以及进一步从Ni-NTA亲和层析获得的目的蛋白L5-CVN蛋白纯度＞98％.结果表明,低浓度的L5-CVN与流感病毒表面糖蛋白gp120就有较高的亲和力.