酸性β-半乳糖苷酶基因密码子优化及高效表达

• 作者: 冷春玲
• 来源期刊: 辽东学院学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: 酸性β-半乳糖苷酶 密码子适应指数 毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 化学工程与材料
• 页码范围: 153-156
• 页数: 4页
• 分类号: Q753
• 字数: 1065字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4939.2012.03.001

摘要

选用酵母偏好密码子,设计合成一种酸性β-半乳糖苷酶基因,并研究其在毕赤酵母中的高效表达。优化后,密码子适应指数（CAI）由原来的0.61提升到0.85。在基因的5＇端融合编码α信号肽序列,在3＇端融合编码6个组氨酸标签序列,并在N端编码α信号肽和编码成熟酸性β半乳糖苷酶基因间分别引入编码kex2和Ste13裂解信号序列。基因克隆到pPICZα-A表达载体,构建成分泌型重组酵母表达载体pPICZα-β-Gal。在醇氧化酶（AOX1）启动子调控下,酸性β-半乳糖苷酶得到高效分泌表达,达到508 mg/L,比优化前提高3倍。重组酸性β-半乳糖苷酶具有天然的酸性β半乳糖苷酶相同的酶活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冷春玲	辽东学院农学院	19	36	3.0	5.0