鹅基因组微卫星富集文库的构建与分析

• 作者: 卢立志 李国勤 李进军 沈军达 沈建良 王德前 田勇 陈黎 陶争荣
• 来源期刊: 中国草食动物科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅 微卫星 富集文库 序列分析
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 5-8
• 分类号: S835.1
• 字数: 3019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-3887.2012.02.001

摘要

为分离鹅(Anser cygnoides)微卫星序列片段,提取鹅基因组DNA,用Hae Ⅲ和RsaⅠ内切酶消化并连接接头,再用接头特异引物进行PCR扩增.扩增产物与生物素标记的(AC)12探针杂交,杂交复合物用链霉亲和素包裹磁珠进行结合,得到单链DNA目标片段.再经PCR扩增,连接pMD19-T载体,转化入感受态大肠杆菌,得到微卫星富集小插入片段DNA文库.用Colony-PCR法筛选获得318个阳性克隆,并进行测序分析.结果表明,所测的318个序列有242个含微卫星序列,197个为有效微卫星序列,其中完全型(perfect)占60.9％,非完全型(imperfect)20.8％,混合型(compound)18.2％.(CA)n重复最为常见.文章为鹅种资源遗传多样性、分子进化、遗传图谱的构建及重要经济性状基因座定位等研究奠定了基础.