海岛棉GBNBS基因的原核表达以及表达产物的活性分析

• 作者: 倪万潮 张保龙 杨郁文 陈天子
• 来源期刊: 棉花学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 NBS-LRR 原核表达 ATPase
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 524-528
• 页数: 5页
• 分类号: S562.035.3
• 字数: 3445字
• 语种: 中文

摘要

分别构建舍有GBNBS基因全长序列以及去除富舍亮氨酸重复区(Leucine-rich repeat,LRR)的部分序列的原核表达载体P3161和NBCD,SDS-PAGE凝胶电泳检测发现在IPTG诱导下,重组载体P3161和NBCD在BL21菌株中可以分别表达90 kDa和60 kDa的目的蛋白,Western blot证明它们为目的基因表达产物.分离纯化这两种蛋白并分析酶活功能,发现GBNBS全长蛋白具有ATPase活性,而去除LRR的缺失蛋白的ATPase活性则大幅降低.GBNBS基因的原核表达以及表达产物的活性研究为进一步了解该基因抗性功能与抗性机制奠定基础.