彗星试验检测体外培养山羊卵母细胞的老化程度

• 作者: 孟永芳 谷建锋 赵晓娥 赵晓鹏 马保华 马斌斌 魏强
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 彗星试验 体外成熟 老化 卵母细胞 山羊
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1433-1440
• 页数: 8页
• 字数: 6059字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2012.12.010

摘要

为提高体外成熟山羊卵母细胞利用率,减少因卵母细胞老化而造成的质量下降,本研究通过彗星试验对体外成熟培养山羊(Capra hircus)卵母细胞的DNA受损程度进行研究.结果表明,随着成熟培养时间的延长,尤其是培养时间超过24 h以后,卵母细胞的极体逐渐退化,其DNA损伤程度明显增加,卵母细胞凋亡和老化的现象越来越严重.在体外成熟培养24 h之内,检测到极体的卵母细胞的比例随着培养时间的延长而显著增加(20 h,(45.74±2.67)％; 22 h,(66.11±1.12)％),卵母细胞平均彗尾长度均小于100μm,其中有极体卵母细胞彗尾长度在0～50μm之间的比例(20 h,(77.27±2.27)％; 22 h,(40.12±1.55)％)小于无极体卵母细胞(20 h,(83.86±1.34)％; 22 h,(51.39±8.45)％).体外成熟培养24 h时,有极体的卵母细胞比例达到最高值(80.19±2.07)％,有极体和无极体卵母细胞的平均彗尾长度基本相同 《96.08±4.52) μm vs(95.25±9.28) μm),有极体卵母细胞的彗尾分布主要以50～100 μm 《45.71±0.50)％)和100～150 μm《35.45±2.92)％)区段为主,而无极体卵母细胞主要分布在0～50 μm((30.92±4.02)％)和50～100 μm((33.02±3.23)％)两个区段.当培养时间超过26 h以后,有极体的卵母细胞比例显著下降(26 h,(72.01±2.88)％; 28 h,(59.77±3.59)％)；无论是有极体或无极体的卵母细胞,其平均彗尾长度都继续增加,彗尾长度分布在150 μm以上的卵母细胞比例迅速增加.培养至30h时,有极体的卵母细胞比例下降至(46.34±2.07)％,其平均彗尾长度为(180.11±10.33) μm,彗尾长度分布在150 μm以上的比例为(58.33±4.81)％；无极体卵母细胞平均彗尾长度为(270±17.72) μm,彗尾长度分布在150 μm以上的比例为(80.95±2.38)％,均高于有极体卵母细胞.本研究结果表明,山羊卵母细胞在体外成熟后会逐渐老化,尤其是在成熟培养时间超过24 h后,老化卵母细胞比例显著增加.本研究可使我们对卵母细胞老化的机理有了更进一步的了解和认识,有助于通过减少卵母细胞老化来提高卵母细胞的质量.