重组蛋白酶抑制蛋白拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用

• 作者: 朱亮华 胡毓华 陆超
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分泌型白细胞蛋白酶抑制蛋白 弹性蛋白酶 炎性介质 转录因子
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 760-762
• 分类号: R729
• 字数: 3274字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-515X.2012.10.015

摘要

目的 克隆分泌型白细胞蛋白酶抑制(SLPI)蛋白基因并表达人SLPI重组蛋白,探讨其拮抗中性粒细胞释放炎性介质的作用.方法 抽提人外周血中性粒细胞mRNA,克隆SLPI基因,构建质粒,转染后抽提纯化蛋白,实验分组后,分别进行不同剂量的SLPI和内毒素(LPS)共处理中性粒细胞.A组:正常对照组(不予LPS和重组SLPI蛋白处理)；B组:LPS处理组(加终质量浓度0.001 g·L-1的LPS)；C组:低剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.010 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS)；D组:中剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.050 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS)；E组:高剂量重组SLPI蛋白干预组(加重组SLPI蛋白0.100 g·L-1和终质量浓度0.001 g·L-1的LPS).然后进行中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性实验、淡性介质释放实验以及转录因子STAT3活性实验,分别测定NE活性、炎性介质IL-6/IL-8表达量及转录因子STAT3的DNA结合活性.结果 成功构建SLPI基因全长cDNA的真核表达载体,发现重组SLPI蛋白呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的NE活性[(17.78±0.54)nmol·L-1 vs (5.46±0.12) nmol·L-1,P＜0.05].重组SLPI蛋白也显著抑制LPS诱导的炎性介质IL-6[ (179.51±6.61) ng·L-1vs( 63.13±4.55) ng· L-1,P＜0.05]和IL-8[( 192.98±7.65) ng· L-1 vs(103.42±4.76)ng · L-1,P＜0.05]的释放及转录因子STAT3的DNA结合力升高.结论 SLPI可有效抑制NE活性,减轻炎性损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆超	南京医科大学第一附属医院儿科	69	226	7.0	9.0
2	胡毓华	南京医科大学第一附属医院儿科	24	72	5.0	7.0
3	朱亮华	南京医科大学第一附属医院儿科	10	18	2.0	4.0