添加不同因子对绵羊类胚胎干细胞多能性的影响

• 作者: 周川 张秀华 林嘉鹏 汪立芹 石庆华 赵云程 金贤华 黄俊成
• 来源期刊: 中国草食动物科学
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊类胚胎干细胞 体外培养 多能性调控因子 候选基因
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 繁殖与生理
• 页码范围: 25-29
• 分类号: S826.3
• 字数: 4042字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-3887.2012.03.007

摘要

为筛选出更有利于维持绵羊类胚胎干细胞(oESC-like cell)多能性的因子,在基础培养基N2B27/CH中,分别添加PD、PD+hLIF、PD+BPM4、PD+hLIF+BMP4,通过比较分析,初步筛选出了比本实验室原培养体系(N2B27/CH+bFGF)更利于维持oESC-like多能性的培养基添加因子.结果显示:基础培养基中添加PD、PD+hLIF后细胞生长较好,细胞之间的结合更加致密；各种培养基培养物都表达AKP与Sox2、Oct4免疫荧光蛋白等oESC-like多能性标志；4种不同培养基与bFGF相比,细胞的生长速度减慢；在基础培养基N2B27/CH中添加PD和PD+hLIF使多能性候选基因Lin28与c-Myc表达量极显著升高(P＜0.01),Nestin的表达量极显著下调(P＜0.01),加入PD+hLIF使Oct4表达量极显著上调(P＜0.01).因此,在oESC-like基础培养液N2B27/CH的基础上,添加PD或PD+hLIF更有利于oESC-like细胞多能性维持.