一种高效便捷的水稻DNA提取法及其应用

• 作者: Christopher W DEREN3 Melissa H JIA 严宗卜 戴陆园 贾育林 赵国珍
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻 DNA提取 分子标记 PCR 抗稻瘟病基因Pita
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 495-499
• 分类号: Q755|Q78
• 字数: 4018字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7216.2012.04.016

摘要

以水稻叶片、根和种子为材料,采用高通量快速法提取基因组DNA,用稻瘟病Pita基因分子标记进行检测,获得与预期片段大小一致的特异性条带,对165份育种材料的检测结果与稻瘟病接种鉴定一致.操作方法如下:将少量水稻叶片、根或种子放入200 μL PCR盘中,加入70 μL缓冲液A(含NaOH和Tween20),在PCR仪中加热到95℃,保持10 min,再加入70 μL缓冲液B(Tris-HCl和EDTA),该提取液可以直接用于PCR扩增.该方法具有几个优点:1)成本低,仅用4种化学试剂,共140 μL提取液;2)操作简便,仅需3步,每人每天可以提取上千份样品;3)仪器设备简单,只用常规的PCR仪;4)可直接提取干种子的DNA;5)DNA质量好,能检测出水稻中的抗稻瘟病单基因Pita,并且与稻瘟病接种鉴定结果一致;6)用量少,只需要5～20 mg叶片、20 mg根或半粒籽粒.尤其是检测大量样本的基因型时,此种方法更显得高效便捷.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国珍	云南省农业科学院粮食作物研究所	54	269	9.0	13.0
2	戴陆园	云南省农业科学院粮食作物研究所	24	293	10.0	16.0