孕激素对子宫内膜癌Ishikawa细胞中claudin-4基因表达的调节作用

• 作者: 冯翠平 李华军 林华 潘晓玉 王雅楠 金妍
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 子宫内膜肿瘤 孕激素类 细胞系,肿瘤 Claudins
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 368-372
• 分类号: R246.3
• 字数: 4959字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2012.05.012

摘要

目的 探讨孕激素对子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞中claudin-4基因表达的调节作用.方法 用浓度分别为2.5、5、10、15、20 mg/L的甲地孕酮培养Ishikawa细胞24、48、72 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测Ishikawa细胞生长的抑制率,选出抑制率最接近50％时甲地孕酮的最佳处理浓度和时间,用于以下实验.以15 mg,/L(最佳处理浓度)的甲地孕酮处理Ishikawa细胞72 h(最佳处理时间),透射电镜观察细胞形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时定量PCR技术测定细胞中claudin-4 mRNA的表达水平,蛋白印迹法检测细胞中claudin-4蛋白的表达水平,细胞免疫荧光染色观察细胞中claudin-4蛋白表达部位的变化.结果 15 mg/L的甲地孕酮处理72 h时,lshikawa细胞生长的抑制率达50％.甲地孕酮处理后,透射电镜下观察,部分Ishikawa细胞明显肿胀,内质网扩张,线粒体数目减少、肿胀呈空泡化,核分裂象少见,严重者见胞质内细胞器消失,膜结构消失；少数Ishikawa细胞表面形成伪足样突起,细胞核溶解,凋亡小体形成.甲地孕酮处理前、后,Ishikawa细胞凋亡率分别为(0.076±0.024)％、(3.934±0.816)％,两者比较,差异有统计学意义(P＜0 05)；Ishikawa细胞中claudin-4 mRNA的表达水平分别为0.64±0.20和0.47±0.15,claudin-4蛋白的表达水平分别为0.94±0.18和0.62±0.15,甲地孕酮处理前、后claudin-4 mRNA和蛋白质的表达水平分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05)；Ishikawa细胞免疫荧光染色,甲地孕酮处理后,claudin-4蛋白的表达部位由细胞膜进入细胞质和细胞核.结论 孕激素可以抑制Ishikawa细胞的生长,其作用机制可能与claudin-4基因表达的降低及细胞凋亡有关.Ishikawa细胞膜表达的claudin-4蛋白整合入细胞内可能与孕激素抑制Ishikawa细胞的生长有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林华	中日友好医院妇产科	14	91	6.0	9.0
2	冯翠平	中日友好医院妇产科	7	12	2.0	3.0
3	潘晓玉	中日友好医院妇产科	13	39	4.0	6.0
4	李华军	中日友好医院妇产科	15	299	7.0	15.0
5	王雅楠	中日友好医院妇产科	2	1	1.0	1.0
6	金妍	中日友好医院妇产科	2	12	1.0	2.0