表面展示鸡传染性支气管炎病毒M41株S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建

• 作者: 叶昱 廖明 林文耀 樊惠英 程晓亮 陈春丽 陈筱薇
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒 M41 表面展示 S1蛋白 重组杆状病毒
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学与兽医学
• 页码范围: 398-402
• 分类号: S852.65
• 字数: 3960字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-411X.2012.03.025

摘要

以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTM Dual,得到重组质粒pFastBac-gp64-dS1.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组穿梭载体Bacmid-gp64-dS1,提取重组Bacmid质粒,以PCR验证其正确性.将阳性重组Bacmid质粒利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-dS1.间接免疫荧光试验表明,该重组杆状病毒可以Sf9昆虫细胞膜表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白.