山羊白细胞介素-4成熟蛋白基因的原核表达及其生物学活性检测

• 作者: 严若峰 宋小凯 张晓燕 徐立新 李祥瑞
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 IL-4 表达 生物学活性
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 1657-1663
• 页数: 7页
• 分类号: S852.4
• 字数: 4902字
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在进行山羊成熟白细胞介素-4的体外表达及重组蛋白生物学活性分析.运用PCR技术以pMD18-T-pGIL-4(pGIL-4为山羊IL-4全序列基因)为模板扩增成熟蛋白(mIL-4)基因,并构建pET-32a(+)-mGIL-4原核表达载体,IPTG诱导目的蛋白表达.使用改进的方法纯化目的蛋白后,采用淋巴细胞转化试验检测重组蛋白对山羊外周血T淋巴母细胞的增殖活性.经测序,mIL-4含339个核苷酸,编码112个氨基酸.表达的重组蛋白约为31.3 ku,主要以包涵体形式表达.通过改进纯化方法获得了高纯度的重组蛋白.试验证明,纯化、复性后的重组蛋白能显著刺激山羊外周血T淋巴母细胞的增殖,并表现出一定的剂量依赖性,8 μg·mL-1增殖能力最强.本研究为山羊重组白细胞介素-4的规模化生产及作为佐剂的开发应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李祥瑞	南京农业大学动物医学院	126	1418	20.0	33.0
2	徐立新	南京农业大学动物医学院	57	304	11.0	14.0
3	严若峰	南京农业大学动物医学院	53	256	10.0	13.0
4	宋小凯	南京农业大学动物医学院	32	84	6.0	8.0
5	张晓燕	南京农业大学动物医学院	12	161	7.0	12.0