中国水仙BAC文库构建的研究

• 作者: 潘东明 潘腾飞 王江波 郭志雄
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 中国水仙 高分子量核DNA BAC文库 脉冲场电泳
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 园艺—研究报告
• 页码范围: 194-197
• 分类号: S682.2+1
• 字数: 3041字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6850.2012.10.037

摘要

为更深入地挖掘中国水仙的基因组信息,筛选与中国水仙品质相关的功能基因,以中国水仙品种‘金盏银台’的黄化叶片为材料,采用改良Zhang法获得高分子量核DNA,经酶切、连接和转化,首次构建了中国水仙基因组BAC文库.结果表明,采用改良zhang法获取的核DNA分子量大于1Mb,适合BAC文库的构建；优化了连接、转化体系,发现载体和插入片段的摩尔比为5∶1时,连接、转化效率最高；经检测,该文库包括69120个克隆,插入片段的平均大小约87 kb,空载率小于1％,大约50％的克隆大小在80～90kb之间；Southern blot结果表明该文库未受到细胞器DNA的污染.