人食管鳞癌细胞系EC109中肿瘤干细胞的分离(富集)与鉴定

• 作者: 于茜 任勇 刘庆 刘强 卞修武 崔有宏 崔翔 张成武 杨浪 郭政军
• 来源期刊: 成都医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 食管鳞状细胞癌 肿瘤干细胞 细胞球 EC109
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 378-382
• 分类号: R737.31
• 字数: 3768字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-2257.2012.03.011

摘要

目的 运用无血清成球培养法从人食管鳞癌细胞系EC109中分离/富集肿瘤干细胞,并对其“干性”特性进行鉴定.方法 将EC109细胞接种至添加1X B27的干细胞培养基(DMEM/F12 1∶1,无血清),于poly-Hema包被的培养皿或低黏附培养板中培养,获取细胞球.采用实时定量PCR方法检测其干性相关转录因子的基因表达,连续传代和平板克隆形成实验评价其自我更新能力,免疫荧光细胞化学法检测其分化前后干性相关转录因子和分化标志物的表达变化,以裸鼠移植瘤实验检测其体内成瘤能力.结果 培养5d能获得EC109细胞的细胞球.细胞球细胞高表达Oct4等干性相关转录因子,具有自我更新能力、分化潜能.裸鼠体内1×104个细胞球细胞能启动肿瘤形成,而单层培养细胞则需要1×105个细胞,且同数量级的细胞球细胞较单层培养细胞所形成的肿瘤体积大.结论 无血清成球培养法能从食管鳞癌细胞系EC109获得细胞球,细胞球富集了肿瘤干细胞.