蓖麻细胞色素P450基因片段的克隆及RNAi表达载体的构建

• 作者: 刘鹏 张春兰 张立军 栾世慧 陈永胜 黄凤兰
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 蓖麻 P450 RNAi 载体构建
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 873-878
• 分类号: Q785
• 语种: 中文

摘要

采用PCR方法克隆了蓖麻细胞色素P450基因的正反2个片段。正向片段长为525个碱基,反向片段长为421个碱基。经测序分析,得到的正向基因片段和反向基因片段与GenBank上的蓖麻细胞色素P450基因（XM_002525863.1）的碱基同源性分别为98.85%和99.51%。利用载体pHANNIBAL和限制性内切酶将正反2个片段连接成具有发夹结构的中间载体pHAN-P450S-P450A,然后将中间载体和表达载体pBI-121连接,构建了P450基因的RNAi植物表达载体,为利用RNA干扰抑制P450基因表达的研究奠定了基础。