草莓轻型黄边病毒CP基因的克隆、序列分析及原核表达

• 作者: 于翠梅 代红艳 刘月学 张志宏 李贺 马跃
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 草莓轻型黄边病毒 外壳蛋白基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 页码范围: 30-34
• 分类号: Q78
• 字数: 3426字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.01.006

摘要

克隆草莓轻型黄边病毒CP基因,并构建其原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达CP蛋白.利用SMYEV的检测引物,通过RT-PCR技术筛选带SMYEV的草莓植株；根据NCBI中SMYEV序列设计扩增CP基因全长引物,通过RT-PCR获得SMYEV沈阳分离物CP基因全长序列；将CP基因克隆到原核表达pGEX-6P-1上,利用IPTG诱导CP基因在大肠杆菌BL21( DE3)中表达蛋白.利用RT-PCR扩增获得SMYEV分离物SY05的CP基因全长序列,由729个核苷酸组成,编码242个氨基酸残基.SY05与其他SMYEV分离物的核苷酸同源性为80.1％～97.4％,氨基酸同源性为92.1％～99.6％,其中,与SMYEV分离物SY03的氨基酸一致性为98.3％.将SY05的CP基因成功克隆到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建了重组表达载体p6P-EV-CP,并将其导入大肠杆菌BL21( DE3)中.SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导SMYEV分离物SY05的CP基因在大肠杆菌中表达出分子量为52.0 kDa的融合蛋白.克隆出SMYEV分离物SY05的CP基因,实现了其在原核细胞中的表达,为SMYEV抗血清的制备奠定了重要基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张志宏	沈阳农业大学园艺学院	114	1389	22.0	32.0
2	代红艳	沈阳农业大学园艺学院	45	577	14.0	23.0
3	李贺	沈阳农业大学园艺学院	58	482	13.0	20.0
4	于翠梅	沈阳农业大学园艺学院	38	205	8.0	12.0
5	刘月学	沈阳农业大学园艺学院	33	172	8.0	12.0
6	马跃	沈阳农业大学园艺学院	31	184	8.0	12.0