重组腺病毒介导p21对小鼠视网膜新生血管生成的抑制作用

• 作者: 袁志刚 郑华宾 韩金栋 颜华
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜新生血管化/预防和控制 基因转移技术 转染 动物实验
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 493-497
• 分类号: R774.1
• 字数: 3978字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2012.05.015

摘要

目的 观察重组腺病毒-p21 (rAd-p21)对氧诱导小鼠视网膜新生血管(RNV)的抑制作用.方法 将56只健康7日龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、rAd-p21组及rAd-无目的基因对照(rAd-NC)组,每组14只.PBS组、rAd-p21组及rAd-NC组建立氧诱导RNV模型,并于小鼠11日龄时玻璃体腔分别注入1μl PBS、rAd-p21及rAd-NC.对照组不做任何处理.小鼠17日龄时,每组处死4只小鼠,摘取眼球分别作荧光视网膜铺片和切片,观察小鼠RNV发生情况;Image-Pro plus 6.0软件测量分析无灌注区面积;同时提取视网膜总RNA和总蛋白,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p21、细胞周期素依赖蛋白激酶2(CDK2) mRNA及蛋白在视网膜组织中的表达.结果 荧光及光学显微镜观察发现,rAd-p21组小鼠视网膜无灌注区、新生血管及突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核较PBS组和rAd-NC组减少;rAd-p21组无灌注区面积较PBS组和rAd-NC组明显减少,组间差异有统计学意义(F=101.634,P＜0.05).RT-PCR及Western blot检测结果显示,rAd-p21组p21 mRNA和蛋白表达明显高于对照组、PBS组及rAd-NC组,组间差异有统计学意义(F＝839.664、509.817,P＜0.05);rAd-p21组CDK2 mRNA和蛋白表达明显低于对照组、PBS组及rAd-NC组,组间差异也有统计学意义(F=301.858、592.882,P＜0.05).结论 rAd-p21可通过上调p21表达、降低CDK2表达,抑制RNV生成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩金栋	天津医科大学总医院眼科	29	152	7.0	11.0
2	颜华	天津医科大学总医院眼科	199	1067	16.0	22.0
3	袁志刚	天津医科大学总医院眼科	7	18	3.0	4.0
4	郑华宾	天津医科大学总医院眼科	5	9	2.0	3.0