大豆胞囊线虫VIGS载体的构建与鉴定

• 作者: 乔月娥 傅露露 孟娉 张怡 李成伟 段素娟 阮九霄 马晓萌
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 病毒诱导的基因沉默 胞囊线虫 肌钙蛋白 酰胺样多肽 烟草脆裂病毒
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 页码范围: 223-226
• 分类号: S435.651
• 字数: 3286字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7091.2012.03.043

摘要

拟克隆大豆胞囊线虫肌钙蛋白(Hg-tnc)和酰胺样多肽(Hg-flp)基因的部分片段,构建胞囊线虫的病毒诱导基因沉默体系(VIGS),以期为大豆抗胞囊线虫抗性品种的培育及胞囊线虫基因功能验证的研究奠定理论基础.利用RT-PCR方法从大豆胞囊线虫中克隆出目的基因,电泳检测表明,克隆的Hg-tnc基因和Hg-flp基因部分片段分别约为1000bp和700bp.将目的基因连接到烟草脆裂病毒载体pYY13上,转化大肠杆菌,利用PCR进行初步鉴定后进行序列测定.结果表明,大豆胞囊线虫Hg-tnc基因和Hg-flp基因已插入到pYY13载体上,VIGS载体构建成功.