灵芝EIM-40漆酶的分离纯化及酶学性质

• 作者: 何国斌 张明亮 柯崇榕 蔡少丽 黄平 黄建忠
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 漆酶 灵芝 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 34-39
• 分类号: Q554
• 字数: 3764字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2012.02.008

摘要

采用冻干浓缩、(NH4)2SO4盐析、Hi Trap phenyl( FF)疏水层析和Q Sepharose Fast Flow离子交换层析对灵芝EIM-40发酵液进行分离纯化,获得纯化漆酶,纯化倍数为14.6,回收率为5.3％.SDS - PAGE银染的结果为单一条带,相对分子质量约为6.53×104.以愈创木酚和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为催化底物进行酶学性质研究,最适pH分别为4.8和4.5,最适温度分别为55和50℃,2种底物在pH4.0～5.0范围内,温度低于50℃时,酶的稳定性都很好.以愈创木酚为底物,Km=645.0 μmol/L;以ABTS为底物,Km=22.2μmol/L.Cu2对该酶起激活作用,Fe2+、Ca2+、Ba2+则完全抑制酶的活性.