猪诱导多能干细胞(iPS)嵌合胚胎的制备

• 作者: 成德 王华岩 马晓玲 马洋洋 高星
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 猪 诱导多功能干细胞(iPS) 嵌合胚胎 piggyBac转座子 孤雌胚胎
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1349-1358
• 页数: 10页
• 字数: 6909字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2012.12.001

摘要

猪诱导多能干细胞(iPS)具有自我更新和多向分化潜能,是医学和细胞生物学研究理想的材料.为了探索猪iPS细胞的胚胎嵌合能力,本实验采用piggyBac转座子系统PB[Act-RFP]DS和Act-PBase载体,共转染猪iPS细胞,获得带有红色荧光标记的猪iPS细胞株PS24-R.并通过显微注射方法,将供体细胞PS24-R注入到4～8细胞期的胚胎腔隙,制备嵌合胚胎,待其继续发育至囊胚阶段,统计PS24-R细胞在胚胎中的嵌合情况.结果显示,通过转座子系统piggyBac标记的猪PS24-R细胞能够稳定表达红色荧光,以其作为供体细胞制备猪嵌合胚胎能够有效观察iPS细胞在胚胎中的嵌合情况.将1、5和10个猪PS24-R细胞和1个猪PS24-R细胞团分别注射到猪胚胎中构建嵌合胚胎,随着猪iPS细胞注射数量的增加,注射胚胎的囊胚率逐渐下降,但嵌合比例逐渐升高.同时与孤雌胚胎相比,嵌合胚胎中多能基因OCT4、SOX2和NANOG表达显著提高.由此可见,采用piggyBac转座子标记的猪PS24-R细胞能够在猪早期胚胎发育阶段实现嵌合,为iPS细胞嵌合猪的生产提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王华岩	西北农林科技大学动物医学院	21	67	5.0	7.0
2	马晓玲	西北农林科技大学动物医学院	3	7	2.0	2.0
3	高星	西北农林科技大学动物医学院	8	67	5.0	8.0
4	成德	西北农林科技大学动物医学院	5	22	2.0	4.0
5	马洋洋	西北农林科技大学动物医学院	3	5	2.0	2.0