构建siRNA慢病毒载体抑制A549细胞株VEGF受体KDR基因的表达

• 作者: 李丹妮 李咏 王彤 王杰
• 来源期刊: 临床医学工程
• 学科: 医学
• 关键词: KDR RNA干扰 慢病毒 A549细胞株
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1664-1666
• 分类号: R329.2+8
• 字数: 2994字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4659.2012.10.1664

摘要

目的 构建针对血管内皮生长因子(VEGF)受体KDR基因的siRNA慢病毒载体,鉴定其对肺癌细胞株A549基因干扰效果.方法 设计合成针对KDR编码区的三条siRNA序列及阴性对照序列,克隆到PGCL-GFP载体,构建重组质粒,行PCR鉴定、DNA测序分析;转染人肺癌细胞株A549,Real-Time PCR及Westem blot分别检测KDR mRNA、蛋白水平变化;细胞计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期.结果 成功构建pGCL/KDR-siRNA重组质粒.A549干扰组KDRmRNA表达率下降,KDR蛋白表达量明显减少,细胞周期改变.结论 构建的pGCL/KDR-siRNA表达载体可在mRNA和蛋白水平上有效抑制A549细胞株KDR基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王杰	沈阳医学院生物化学教研室	33	124	7.0	9.0
2	李丹妮	沈阳医学院生物化学教研室	11	35	2.0	5.0
3	王彤	沈阳医学院生物化学教研室	21	64	6.0	6.0
4	李咏	沈阳医学院生物化学教研室	5	11	2.0	3.0