大肠杆菌BL21(DE3)氨基葡萄糖代谢调控相关基因的敲除及glmS在其中的表达研究

• 作者: 严维耀 乐科易 何京桦 涂宇鹏
• 来源期刊: 复旦学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌BL21(DE3) 氨基葡萄糖 λRed同源重组 氨基葡萄糖合成酶 代谢工程
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 796-802
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

氨基葡萄糖(Glucosamine,GleN)是一类广泛使用的保健品,对于人类软骨再生及关节炎的临床治疗都具有良好的疗效.为构建以代谢工程为基础的氨基葡萄糖生产菌株,采用λRed同源重组系统将大肠杆菌BL21(DE3)中甘露糖-磷酸转移酶系统操纵子(manXYZ)和乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)转运和代谢特异性系统操纵子(nagBACD-nagE)进行双剔除.随后构建含新型氨基葡萄糖合成酶基因(glmS)的表达载体pETG,并将它转化该双操纵子剔除菌株.结果表明,改造后的菌株不能以GleN或GlcNAc作为碳源进行代谢生长.表达GlmS菌株的上清液经Ni-NTA亲和层析纯化,其酶活性达8.63 U/mg,表明该菌株已具备发酵生产GleN的初步特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严维耀	复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系	20	224	8.0	14.0
2	乐科易	复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系	5	20	2.0	4.0
3	涂宇鹏	复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系	1	4	1.0	1.0
4	何京桦	复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系	2	6	2.0	2.0