酮古龙酸菌山梨酮脱氢酶的原核表达及活性鉴定

• 作者: 张惟材 张谷青 汪建华 游松 熊向华 陈微微
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 山梨酮脱氢酶 酮古龙酸菌 原核表达 活性电泳 生物活性
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 511-514
• 分类号: Q78
• 字数: 3347字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.04.010

摘要

目的:克隆酮古龙酸菌Y25的山梨酮脱氢酶基因sndh2,在大肠杆菌中进行表达,并检测表达产物的活性.方法:以酮古龙酸菌Y25基因组DNA为模板,PCR扩增sndh2基因,连接到pET22b表达载体后转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达；对菌体裂解液进行SDS-PAGE分析；以D-木糖为底物,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后活性染色及DCIP检测法鉴定表达产物的脱氢酶活性.结果:扩增得到1290 bp的山梨酮脱氢酶基因；构建了表达质粒pET22b-sndh2,SDS-PAGE结果显示获得相对分子质量为43.1×103的可溶性表达产物；非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳胶上出现的蓝黑色条带及DCIP检测液颜色的变化说明表达产物在以D-木糖为底物时表现出脱氢酶活性.结论:在大肠杆菌中表达的山梨酮脱氢酶具有生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	游松		65	424	9.0	20.0
2	陈微微	军事医学科学院生物工程研究所	3	2	1.0	1.0
3	熊向华	军事医学科学院生物工程研究所	46	135	6.0	9.0
4	汪建华	军事医学科学院生物工程研究所	46	163	6.0	10.0
5	张惟材	军事医学科学院生物工程研究所	75	603	13.0	22.0
6	张谷青	军事医学科学院生物工程研究所	1	1	1.0	1.0