呼吸道合胞病毒TaqMan探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 张骞 王翔 薛鹏浩 赵智慧 郑丽舒 郑文芝 魏建民
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 呼吸道合胞病毒 TaqMan探针 实时定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 211-214
• 分类号: Q78
• 字数: 3674字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.02.016

摘要

目的:建立呼吸道合胞病毒(RSV)核酸特异、快速、敏感的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并对临床样本进行检测.方法:比对编码RSV非编码蛋白的基因序列,选取其保守片段设计引物和探针,建立实时荧光定量RT-PCR检测方法,并与传统RT-PCR方法进行比较,分别对两者的灵敏性、特异性、重复性及临床样本检验的适用性进行评价.结果:所建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于RSV的特异性检测.相对于传统RT-PCR方法100拷贝/反应的检测灵敏度,实时荧光定量RT-PCR的检测灵敏度达到10拷贝/反应,检测范围为1010～101拷贝/反应,且具有良好的特异性和重复性.从169份临床呼吸道标本中检出RSV阳性40例,高于普通PCR方法(31/169).结论:建立了RSV的TaqMan探针实时定量PCR检测方法,并可用于临床鼻咽拭子样本的检测,在临床上具有较好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏建民	内蒙古农业大学生命科学学院	20	150	7.0	11.0
2	郑文芝	内蒙古农业大学生命科学学院	2	9	2.0	2.0
3	张骞	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	15	118	4.0	10.0
4	薛鹏浩	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	2	9	2.0	2.0
5	王翔	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	1	4	1.0	1.0
6	赵智慧	内蒙古农业大学生命科学学院	2	9	2.0	2.0
7	郑丽舒	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所	25	84	5.0	8.0