黄花蒿HDS基因的克隆与功能分析

• 作者: 廖志华 张祖荣 彭梅芳
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 黄花蒿 羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因 基因克隆 生物信息学分析 青蒿素
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 148-154
• 分类号: R282.21
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆获得黄花蒿MEP途径中必需关键酶——羟甲基丁烯基-4-磷酸合成酶基因(HDS),并进行生物信息学分析和功能互补分析研究.方法 对已知的其他种子植物HDS基因的核苷酸序列进行多重序列比对,选取保守区域设计简并引物,利用同源扩增和cDNA末端快速扩增技术从黄花蒿中获得目的基因；利用BLAST进行序列比对,ORF Finder寻找开放阅读框,并用MEGA3.0中的临位相联法构建进化树.结果 得到1条长2324 bp的HDS cDNA序列,其ORF 框长1854 bp,编码617个氨基酸残基的蛋白；生物信息学分析显示,黄花蒿HDS基因AaHDS与其他种子植物来源的HDS高度同源;功能互补分析表明,AaHDS能互补突变菌株Escherichia coli MG1655 ara＜＞ HDS中缺失的HDS功能,使突变菌株恢复生长,证明AaHDS具有典型的HDS基因功能.结论 首次克隆获得黄花蒿HDS基因,为青蒿素的代谢工程研究提供相应的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张祖荣	重庆文理学院生命科学系	38	144	6.0	11.0
3	廖志华	西南大学生命科学学院三峡库区生态环境教育部重点实验室	53	458	13.0	19.0
6	彭梅芳	西南大学生命科学学院三峡库区生态环境教育部重点实验室	3	23	2.0	3.0