改良三维条件下人胚胎干细胞向内皮细胞的分化及功能

• 作者: 刘艳华 周曼倩 宋祥和 李宗金 王丽娜 王宝玉 童玲玲 苏位君
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 人胚胎干细胞 人胚胎干细胞来源内皮细胞 三维分化法 CD31
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 539-544
• 页数: 6页
• 分类号: R322.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2012.06.001

摘要

目的 建立一种改良的三维分化无血清方法,对人胚胎干细胞(hESCs)向内皮细胞进行分化,并对这种方法得到的人胚胎干细胞来源内皮细胞(hESC-ECs)进行功能检测.方法 在低附着培养皿中培养未分化的H9hESCs12 d,使其形成类胚体(EBs),12d后将已形成的EBs收集起来,用浓度为1.5 mg/ml的I型鼠尾胶原重悬,加入六孔板中,在37℃待胶原凝固后加入EGM-2培养基培养3d,获得出芽类胚体后用0.25％胶原酶I和0.56 U/ml Liberase Blendzyme消化芽生类胚体各20 min,采用流式技术分选出其中CD31阳性的细胞,并用乙酰化低密度脂蛋白(ac-LDL)摄取实验和成管实验验证这部分细胞的内皮细胞功能.结果 建立了一种基于胶原培养环境的三维分化方法,采用这种方法能够将hESCs向内皮细胞分化的效率提高到18％,最终获得的hESC-ECs具有和人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)相似的细胞表面标志物,并在乙酰化LDL吞噬实验和血管新生实验中表现出良好的内皮细胞功能.结论 建立的改良三维分化方法能够明显提高hESCs向内皮细胞的分化效率,是一种简单高效的分化方法,同时无血清培养方法为将来hESC-ECs的临床应用提供了可能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽娜	南开大学医学院免疫学系	14	66	5.0	8.0
2	宋祥和	山东省日照市中医院心内科	4	11	2.0	3.0
3	李宗金	南开大学医学院病理生理学系	9	12	2.0	3.0
4	刘艳华	南开大学医学院免疫学系	4	9	2.0	3.0
5	苏位君	南开大学医学院病理学系	2	7	2.0	2.0
6	王宝玉	南开大学人民医院内分泌科	1	2	1.0	1.0
7	周曼倩	南开大学医学院免疫学系	1	2	1.0	1.0
8	童玲玲	南开大学医学院病理生理学系	1	2	1.0	1.0