人工microRNAs 对拟南芥At1g13770和At2g23470基因的特异沉默

• 作者: 李文超 赵淑清
• 来源期刊: 遗传
• 关键词: 拟南芥 DUF647基因家族 人工microRNA 基因沉默
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 348-355
• 页数: 8页
• 字数: 4518字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2012.00348

摘要

DUF647 (Domain of unknown function 647) 蛋白家族是在真核生物中广泛存在的、高度保守的蛋白家族.拟南芥中该基因家族共有6 个成员,迄今为止拟南芥DUF647 家族中4 个成员的功能尚不清楚.文章以拟南芥内源MIR319a 前体为骨架,构建了敲减DUF647 家族中2 个基因At1g13770 和At2g23470 表达的人工microRNAs(Artifical microRNAs,amiRNAs).利用WMD(Web microRNA designer)平台设计分别靶向At1g13770和At2g23470 基因的amiRNAs 序列,通过重叠PCR 置换拟南芥MIR319a 前体序列.构建融合amiRNAs 前体的植物表达载体pCHF3-amiRNAs,在农杆菌介导下转化拟南芥.RT-PCR 分析表明,amiRNAs 能够显著抑制At1g13770 和At2g23470 基因的表达,获得了抑制效果明显的转基因株系.At2g23470-amiRNA 转基因植株At2g23470 转录水平的下调导致育性严重下降.文章为进一步研究这两个基因的功能奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵淑清	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	23	857	11.0	23.0
2	李文超	山西大学生物技术研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室	4	10	1.0	3.0