过氧亚硝基阴离子对实验小鼠骨髓源内皮祖细胞的损伤作用

• 作者: 侯丹丹 刘腾 徐海波 李笑 王可 王雯 赵倩 马璐
• 来源期刊: 微循环学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 过氧亚硝基阴离子 内皮祖细胞 凋亡 3-硝基酪氨酸
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 基础与实验
• 页码范围: 1-4,后插1,后插2
• 页数: 6页
• 分类号: R363.2
• 字数: 3990字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1740.2012.04.001

摘要

目的:观察过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对实验小鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)的体外损伤作用.方法:无菌抽取4周龄雄性C57小鼠骨髓,密度梯度离心法分离获取单个核细胞,EGM-2培养基诱导培养EPCs.用免疫荧光染色法进行EPCs表面标志物检测和功能试验鉴定EPCs,培养2~3代后用于实验.通过不同浓度的3-吗啉斯德酮亚胺(SIN-1,CONOO-供体)作用于EPCs 24h,确定SIN-1的有效作用剂量.将EPCs分为空白对照组、SIN-1组和FeTMPyP(ONOO-清除剂)干预组,分别用MTT法检测各组EPCs存活率,TUNEL法检测EPCs凋亡,免疫荧光染色法检测细胞内ONOO-生成印记——3-硝基酪氨酸(NT)表达情况.结果:上述培养细胞表面标记物和功能试验均阳性,是EPCs.800μM SIN-1刺激24h后EPCs存活率较空白对照组明显下降(P<0.05),10μM FeTMPyP干预能抑制这种作用.SIN-1刺激后EPCs凋亡率较空白对照组明显增加(P<0.05),FeTMPyP干预能抑制SIN-1诱导的EPCs凋亡.SIN-1刺激EPCs后细胞内NT表达较空白对照组明显增加(P<0.05),FeTMPyP干预能减少NT的表达.结论:SIN-1能够介导硝化应激,诱导EPCs凋亡,造成EPCs损伤,FeTMPyP干预能抑制SIN-1的上述作用.