转乳铁蛋白肽和α干扰素基因的牛胎儿成纤维细胞的制备

• 作者: 余大为 刘岩 张守峰 张锦霞 朱化彬 杜卫华 秦彤 范宗兴 赵学明 郝海生
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 乳铁蛋白肽 α干扰素 转基因 牛胎儿成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1547-1553
• 页数: 7页
• 分类号: S823|S814.8
• 字数: 6215字
• 语种: 中文

摘要

旨在构建含有乳铁蛋白肽基因和a干扰素基因的载体,并制备转基因牛胎儿成纤维细胞,为研制抗乳房炎和口蹄疫转基因克隆牛提供供体细胞.本研究构建了由山羊β-酪蛋白启动子启动的牛乳铁蛋白肽基因和由CMV启动子调控的人α干扰素基因的载体,以EGFP基因作为报告基因,neo基因作为筛选基因；分别采用脂质体和电击法转染牛胎儿成纤维细胞,G418筛选得到转基因阳性细胞,并用PCR方法检测转基因细胞中目的基因的整合情况,用Western blotting检测α干扰素蛋白的表达.结果,得到了同时含有牛乳铁蛋白肽基因和人α干扰素基因的转基因牛胎儿成纤维细胞,并且α干扰素蛋白在转基因细胞中能有效表达.