细胞内p53蛋白LC-MS/MS定量方法及其应用

• 作者: 吴梦秋 李盈淳 汤志远 王广基 郝海平
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: p53 LC-MS/MS 放线菌素D 定量
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 519-525
• 页数: 7页
• 分类号: R917
• 字数: 5146字
• 语种: 中文

摘要

建立细胞样品中p53蛋白的LC-MS/MS定量方法,应用该定量方法测定放线菌素D作用下细胞中p53表达量的变化.采用免疫沉淀法提取细胞样品中的p53蛋白,对提取后的样品进行酶解,基于肽图分析选择特异性肽段VEY-LDDR(m/z 455.22+-681.21+)作为定量肽段,设计合成肽段VEYIEDR(m/z 462.12+-695.21+)作为内标肽段,建立该肽段的LC-MS/MS定量方法,通过该肽段表征p53蛋白的量；应用该质谱定量方法对放线菌素D给药后的HCT116细胞中的p53蛋白的表达量进行测定.p53蛋白质谱定量方法学考证表明,方法的线性良好(R2 =0.999 3),范围2.2～112.3 pmol/mL；专属性好,基质中无干扰成分,批内批间精密度及稳定性均符合生物样品的测定要求；放线菌素D给药后细胞中p53蛋白的表达量呈给药浓度与给药时间依赖性增加.建立的细胞样品中p53蛋白的LC-MS/MS定量方法可以准确的测定细胞内的p53蛋白表达量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王广基	中国药科大学药物代谢动力学重点实验室	254	2752	29.0	39.0
2	郝海平	中国药科大学药物代谢动力学重点实验室	41	428	12.0	20.0
3	李盈淳	中国药科大学药物代谢动力学重点实验室	2	1	1.0	1.0
4	吴梦秋	中国药科大学药物代谢动力学重点实验室	2	7	1.0	2.0
5	汤志远	中国药科大学药物代谢动力学重点实验室	1	1	1.0	1.0