空肠弯曲菌DNA疫苗构建及其疫苗免疫程序研究

• 作者: 余妍 夏嫱 姚新生 孙万邦 徐岗村 杜联峰 杨瑞 王宜峰 王胜香 罗军敏
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 空肠弯曲菌 peblA基因 载体构建 免疫程序
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 631-634,644
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 3266字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.07.013

摘要

目的:构建空肠弯曲菌peb1A基因真核表达载体,探讨DNA疫苗不同免疫程序的免疫效果.方法:以重组pET28a(+)-peb1A质粒为模板,将空肠弯曲菌peb1A基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转染COS-7细胞中表达,Western blot 鉴定表达蛋白;昆明小鼠随机分组:设空白对照组、空载体对照组、pcDNA3.1(-)-peb1A实验组,用ELISA法检测免疫后的昆明小鼠血清IgG和IgM抗体水平.结果:重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A经双酶切和PCR鉴定,构建正确.peb1A基因测序结果与GenBank中peb1A 基因序列一致.重组质粒成功转染COS-7细胞,并能正确表达重组蛋白.裸DNA组IgG水平均高于两对照组,有显著性差异(P<0.05).同一剂量短时间(0、10、20天)免疫程序优于长时间(0、15、25、35天)免疫程序 (P<0.05).结论:成功构建空肠弯曲菌真核表达重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A,其经肌肉注射免疫小鼠,具有较好的免疫原性,短时间免疫程序免疫效果好.