猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2的克隆表达

• 作者: 付晓萍 冯励 李永强 高斌
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E2基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2012,（17）
• 所属期刊栏目: 兽医-应用研究
• 页码范围: 82-86
• 分类号: S855.3
• 字数: 4371字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6850.2012.17.016

摘要

为了研究不同时间段细胞MHC分子表达的变化情况,从分子水平上说明E2基因与NHC之间的关系.本研究克隆了中国猪瘟病毒强毒石门毒株E2基因,构建了pcDNA 3.0真核表达质粒P-E2基因.限制性内切酶进行双酶切和序列分析鉴定E2基因插入位置、方向和读码框架的正确性.构建成功的真核表达质粒P-E2,用脂质体转染方法瞬时转染进行体外细胞表达,转染后24、48h后用Western-blot和间接免疫荧光技术检测P-E2基因质粒在PK-15细胞内的表达情况.结果表明:用His抗体进行间接免疫荧光检测发现E2基因得到表达,并定位于细胞浆,同时Western-blot检测后发现重组质粒P-E2转染后也在PK-15细胞中得到了表达.为进一步研究猪瘟病毒与宿主细胞之间的关系,病毒的致病机理提供了基础材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李永强	云南农业大学食品科学技术学院	50	202	9.0	10.0
2	付晓萍	云南农业大学食品科学技术学院	64	218	8.0	10.0
3	高斌	云南农业大学食品科学技术学院	56	415	10.0	18.0
4	冯励	云南农业大学食品科学技术学院	15	37	4.0	5.0