水稻黑条矮缩病毒基因组S7编码的2个非结构蛋白在病株中的表达检测

• 作者: 吕明芳 张恒木 羊健 陈剑平
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻黑条矮缩病毒 非结构蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-15
• 分类号: Q756|S435.111.4+9
• 字数: 6404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7216.2012.01.003

摘要

水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)基因组片段S7含有2个非重叠的阅读框,所编码的蛋白分别为p7a和p7b.根据RBSDV S7序列(EU111804)设计特异性引物分别扩增编码p7a和p7b蛋白的基因片段,并亚克隆至原核表达载体pET-32a(+)和pSBET上,再以大肠杆菌BL21( DE3) pLysS或BL21(DE3)pLysE为宿主菌进行高水平表达,利用纯化的蛋白免疫小鼠,制备了p7a和p7b蛋白的特异性抗血清.蛋白质印迹分析表明p7a和p7b蛋白均在水稻病株中表达,但p7a含量较为丰富,易于在病株中检测到,而p7b在病株中含量则很低；在病毒粒子中,两者均未检测到任何信号,表明两者均为RBSDV的非结构蛋白.