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摘要:
目的 探讨钙调素-43( CaM)在生长相关蛋白(-43)(GAP-43)调控细胞周期过程中的作用. 方法 利用反转录病毒体系构建表达不同活性状态的GAP-43(即野生型、非磷酸化型和假磷酸化型GAP-43)NIH3T3细胞模型,并分别命名为表达野生型GAP-43 (3T3-G)、表达非磷酸化GAP-43(3T3-A)和表达假磷酸化GAP-43 (3T3-D);另设对照组(转染空载体NIH3T3细胞).通过免疫组织化学及Western blotting鉴定各型细胞模型转入GAP-43的情况;应用免疫共沉淀检测各型GAP-43与CaM的功能关系;应用细胞生长曲线、BrdU累积标记法、BrdU脉冲标记法测定各型转GAP-43细胞的细胞周期. 结果 免疫组织化学和Western blotting结果显示,NIH3T3细胞能够表达转入的各型GAP-43.其中,3T3-A细胞增殖速度较其他细胞减缓.免疫共沉淀显示,3T3-A中有GAP-43和CaM相互作用表现;3T3-G中GAP-43和CaM有少量相互作用;3T3-D与3T3-P中则相互作用.累积BrdU测定,脉冲BrdU测定M期的实验表明,3T3-P细胞无明显周期改变;3T3-D与3T3-G细胞的周期延长;3T3-A细胞的周期明显延长并显示G1期明显延长. 结论 表达GAP-43的细胞其增殖表现可能是由于GAP-43结合了CaM,使之与Ca2+的结合减少而引起细胞周期(尤其是G1期)的延长.
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文献信息
篇名 钙调素在生长相关蛋白-43调控细胞周期中的作用
来源期刊 解剖学报 学科 医学
关键词 生长相关蛋白-43 NIH33细胞 钙调素 细胞周期 BrdU 免疫印迹法 免疫组织化学
年,卷(期) 2012,(3) 所属期刊栏目 细胞核分子生物学
研究方向 页码范围 340-346
页数 分类号 R742.5
字数 6499字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.0529-1356.2012.03.010
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 徐群渊 11 22 3.0 4.0
2 程蓓 1 0 0.0 0.0
3 赵君朋 2 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
生长相关蛋白-43
NIH33细胞
钙调素
细胞周期
BrdU
免疫印迹法
免疫组织化学
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解剖学报
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