草鱼出血病病毒vp6核酸疫苗的免疫效果评估

• 作者: 倪金俤 刘林 徐诗英 曹广力 李婧慧 杨鸢劼 薛仁宇 贡成良 邹勇 陈辉
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 草鱼出血病病毒 vp6基因 核酸疫苗 免疫 相对存活率
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 页码范围: 841-847
• 分类号: S942
• 字数: 7445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2012.00841

摘要

为了评估草鱼出血病病毒(GCRV)vp6基因核酸疫苗的免疫效果,将vp6基因克隆进pFastBacTMDual载体杆状病毒的多角体蛋白(Ph)启动子下游,同时将团头鲂(Megalobrama amblycephala)β-actin启动子控制的vp6基因克隆进杆状病毒的P10启动子下游,获核酸疫苗载体pFastBac-FA-VP6-ph-VP6.按每尾分别注射疫苗载体10、30、60 μg的剂量免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)(体长14 - 20 cm,体质量60 - 120 g),同设pFastBacTMDual载体(30 μg/尾)阴性对照组及空白对照组(0.4 mL/尾无菌水).于免疫后不同时间通过RT-PCR检测免疫鱼体中vp6基因的表达,并于免疫后第14、21、28、49、70天分别通过间接凝集反应检测血液中的抗体水平,并在免疫第21天感染GCRV评估免疫保护效果.结果显示,核酸疫苗免疫草鱼后,各免疫组均有抗体产生,抗体效价在免疫后第28天达到最高；攻毒后每尾注射疫苗载体10、30、60 μg组的死亡率分别为0％、0％、5％,pFastBacTMDual载体对照组和空白对照组分别为30％和100％.表明构建的核酸疫苗对草鱼病毒性出血病有较好的免疫保护效果.