文蛤Clq基因的克隆与表达及其重组蛋白活性的研究

• 作者: 刘卫东 李云峰 李宏俊 赫崇波 隋立军 高祥刚
• 来源期刊: 水产科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 文蛤Clq cDNA克隆 荧光定量PCR 重组蛋白 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 321-328
• 分类号: Q785
• 字数: 6190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-1111.2012.06.003

摘要

利用构建的文蛤cDNA文库,克隆得到了文蛤Clq基因全长cDNA序列,该序列全长1213bp,5′UTR为316 bp,3′UTR为372bp,开放阅读框长度为525bp,编码174个氨基酸.在文蛤Clq(MmClq)蛋白中,Clq结构域与软体动物、两栖类动物和脊椎动物中的Clq结构域均具有较高的同源性.通过荧光实时定量PCR,MmClq mRNA在所检测的各个组织中均有表达,在肝胰脏中表达量最高.在细菌感染试验中,文蛤受鳗弧菌感染后,Clq相对表达水平有明显的上升调节,注射2h,MmClqmRNA表达量最高,为对照组的2.19倍.包含成熟肽的MmC1q cDNA片段被重组,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,采用牛津杯法对MmClq重组蛋白进行体外抑菌试验,但并未检测到明显的抑菌活性.