年轻与老年小鼠血管内皮细胞microRNA的差异表达

• 作者: 崔进 张俊斌 朱小南 王劲松 王深明 陈鹏
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 老年 血管内皮细胞 microRNA 内皮细胞型一氧化氮合成酶
• 年，卷（期）: 2012,（31）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2205-2209
• 分类号: R2
• 字数: 4198字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2012.31.015

摘要

目的 观察年轻与老年小鼠血管内皮细胞(EC) microRNA (miRNA)表达差异及意义.方法 原代分离并培养雄性C57BL/6J小鼠年轻和老年EC,免疫组化Ⅷ因子染色对EC进行鉴定,体外比较年轻和老年EC增殖速度,采用miRNA基因芯片分析年轻与老年EC内miRNA表达差异谱,荧光定量PCR(qRT-PCR)进行验证.免疫印迹(Western blot)检测EC内皮细胞型一氧化氮合成酶(eNOS)表达.结果 免疫组化Ⅷ因子染色证实原代分离的细胞为EC；在0.5％、1％、5％、10％、20％血清浓度下,MTT比色法测得年轻EC的吸光度值(A值)分别为0.260±0.006、0.350±0.011、0.404 ±0.027、0.519±0.034、0.590±0.040；老年EC的A值分别为0.360±0.011、0.480±0.019、0.532±0.025、0.641±0.036、0.710 ±0.038,发现老年EC增殖速度比年轻EC快(P＜0.05)；排除性别差异,经miRNA基因芯片,qRT-PCR证实miR-135a、miR-182、miR-96、miR-31、miR-126-3p和miR-362-5p在年轻EC表达上调(表达差异倍数分别为34.5±1.8、5.4±1、12.8±1、3.1±0.6和14.5±1.1),miR-335-3p和miR-335-5p在老年EC表达上调,表达差异倍数分别为3.3±0.6和2.1±0.3；其中,老年EC内miR-335-3p的上调,年轻EC内miR-135a,miR-96上调可能与老年EC内eNOS表达降低相关.结论 随年龄增长,EC的miRNA发生变化,调节EC内的基因表达,与衰老相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱小南	中山大学基础医学院	18	110	6.0	10.0
2	王深明	中山大学附属第一医院血管外科	232	1598	20.0	29.0
3	陈鹏	中山大学附属第一医院血管外科	8	36	2.0	6.0
4	王劲松	中山大学附属第一医院血管外科	34	205	7.0	13.0
5	崔进	中山大学附属第一医院血管外科	12	13	2.0	3.0
6	张俊斌	中山大学附属第一医院血管外科	4	9	1.0	3.0