奥尔森帕金虫环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立及应用

• 作者: 任伟成 曲朋 梁彦韬 潘鲁青 王崇明 贾志磊 黄倢
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 奥尔森帕金虫 内转录间隔区 环介导等温扩增 贝类 检测
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 页码范围: 1281-1289
• 分类号: S941.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2012.27956

摘要

奥尔森帕金虫是重要的贝类病原性寄生虫之一,为建立快速、灵敏、准确和使用简便的检测方法,实验根据奥尔森帕金虫5.8S rDNA中的内转录间隔区(internal transcribedspacer,ITS)序列,建立了环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,并对反应温度、反应体系中Mg2+浓度和反应时间进行了优化.该方法的检测灵敏度约为30拷贝质粒DNA,并且特异性较强,与海水帕金虫、包纳米虫、波豆虫及急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)等病原均无交叉反应.使用LAMP法对两批菲律宾蛤仔样品进行检测,结果表明,LAMP检测与传统PCR检测相比,灵敏度更高,检测结果更准确.实验所建立的奥尔森帕金虫LAMP检测方法简单、快速、灵敏且特异性强,可以在沿海贝类养殖厂及条件简陋的实验室使用.