小鼠不同电特性的心肌细胞Kir2.1、SCN5a和SCN1b通道基因的表达:膜片钳结合单细胞RT-PCR技术研究

• 作者: 唐明 梁华敏 胡新武 骆红艳
• 来源期刊: 生理学报
• 学科: 医学
• 关键词: 膜片钳技术 单细胞逆转录聚合酶链反应 电生理 分子生物学 胚胎心肌细胞
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 82-86
• 页数: 5页
• 分类号: R33
• 语种: 中文

摘要

本文旨在应用膜片钳技术结合单细胞逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)技术研究小鼠胚胎心肌细胞的不同电生理学特点的分子生物学基础.应用胶原酶B消化分离得到小鼠胚胎早期(E10.5)单个心肌细胞,先用膜片钳技术记录单个胚胎心肌细胞的动作电位,随即应用玻璃微电极吸取该细胞内容物,进一步应用RT-PCR技术检测该单个心肌细胞离子通道基因Kir2.1、SCN5a和SCNlb的表达,以GAPDH为内参基因.全细胞电流钳技术记录到心室肌样细胞、心房肌样细胞和起搏样细胞的动作电位.心室肌样细胞和心房肌样细胞动作电位的最大舒张期电位(maximum diastolic potential,MDP)较起搏样细胞更负,0期最大除极速度(maximum velocity of depolarization,Vmax)更快；心室肌样细胞动作电位的MDP相对心房肌样细胞更负.相对应的,心室肌样细胞的Kir2.1、SCN5a、SCN1b三种基因表达均较强；心房肌样细胞的SCN5a表达较强,而SCN1b和Kir2.1相对心室肌样细胞表达稍弱；而起搏样细胞的上述三种基因表达均很弱.不同类型心肌细胞动作电位的基本特点与其基因表达密切相关,应用膜片钳技术结合单细胞RT-PCR技术可以敏锐检测到特定电生理特点的分子生物学基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐明		30	117	5.0	9.0
2	骆红艳		11	40	4.0	6.0
3	胡新武		20	84	5.0	8.0
4	梁华敏		13	34	3.0	5.0