四种显微技术观测大鼠颌下腺细胞与丝素-壳聚糖体外共培养的形态学特点

• 作者: 何洋洋 刘焱 易新 李波 矫贞涛 谭学新
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 组织工程 颌下腺 丝素-壳聚糖 显微技术
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 70-74
• 分类号: R33
• 字数: 4239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671.7856.2012.02.016

摘要

目的 采用倒置显微镜、扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)、荧光显微镜和激光共聚焦显微镜(( laser scanning confocal microscopy,LSCM))技术对大鼠颌下腺细胞(rat submandibular gland cells,RSMGs)与丝素-壳聚糖( silk fibroin-chitosan,SFCs)的体外复合培养进行形态学观察.为观测、评估种子细胞在三维支架的内部生长情况提供技术支持.方法 取0～8d龄SD大鼠的颌下腺,对大鼠颌下腺细胞进行原代培养、分离纯化并传代；用抗细胞角蛋白单克隆抗体( CK8)及淀粉酶抗体的免疫细胞化学染色鉴定细胞来源.选取传至第二代的对数生长期的RSMGs作为种子细胞,选取SFCs共混膜(5×5×2)mm作为支架材料构建组织工程化涎腺样结构.将种子细胞与支架材料复合培养并分别于倒置显微镜、SEM、荧光显微镜和LSCM下观察二者复合生长情况.结果 倒置显微镜可以直接观察活细胞与支架复合生长情况,方法简单易行.SEM可以较精确的展示细胞支架复合生长的表面超微结构.经过荧光染料的着色,荧光显微镜和LSCM都可以观察到支架上锚定的种子细胞.荧光显微镜可见细胞核的荧光信号均匀的分布在支架孔隙内.LSCM通过层扫描及三维重建技术对较厚的标本获取图像；并可以通过旋转图像,从不同角度观察细胞支架复合物的三维剖面或整体结构,得到更为准确的定位信息.结论 四种显微技术均可应用于RSMGs与SFCs体外共培养的形态学观测.LSCM的三维重建技术结合荧光染料标记可以较好地获得RSMGs与SFCs复合生长的情况,有着较广泛的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李波	中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理教研室	126	286	8.0	11.0
2	谭学新	中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理教研室	61	328	10.0	14.0
6	易新	中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理教研室	15	24	3.0	4.0
7	刘焱	中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理教研室	3	3	1.0	1.0
8	矫贞涛	中国医科大学口腔医学院口腔颌面外科	2	19	1.0	2.0
9	何洋洋	中国医科大学口腔医学院口腔解剖生理教研室	1	1	1.0	1.0