烟草优质品种叶片全长cDNA文库的构建和质量分析

• 作者: 姜宝杰 庄伟建 张冲 曾建斌 蔡铁城 贺小彦 陈华 陈顺辉
• 来源期刊: 中国烟草学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草 叶片 SMART技术 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 85-91
• 分类号: S572|Q7
• 字数: 3567字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5708.2012.01.015

摘要

为研究优质烟叶的分子基础,以翠碧一号不同生长时期的叶片为材料,CTAB法提取总RNA,利用SMART技术合成全长cDNA,之后按经修改的Clontech技术成功构建了烟草叶片全长cDNA文库.经鉴定,初级文库库容为3.85×106个克隆,重组率为100％,重组子插入片段集中在750-2000 bp之间.随机挑取25个克隆测序后,经生物信息学分析表明,烟草上已经报道的基因占10条,11条为全长基因序列；20条序列有功能注释.综合分析表明,所构建的文库质量较高,达到了基因的分离、筛选和克隆的建库目的.