小剂量脂多糖诱导血管内皮细胞TLR4的表达

• 作者: 常文秀 曹书华 王勇强 路玲 高红梅
• 来源期刊: 中国中西医结合外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 脂多糖 血管内皮细胞 TOLL样受体4
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 47-51
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3989字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6948.2012.01.014

摘要

目的:观察小剂量脂多糖(LPS)对人脐静脉内皮细胞(ECV304)TOLL样受体4(TLR4)表达的影响.方法:体外培养ECV304细胞,分别与LPS及LPS+TLR4抗体进行孵育.MTT法检测细胞的增殖活性,免疫组化染色法检测细胞表面TLR4的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞核核内TLR4-mRNA及IL-8mRNA的表达.结果:LPS(10~50 ng/mL)刺激ECV304细胞24 h内,细胞增殖活性无明显变化(P ＞ 0.05);而以100 ng/mL 刺激24 h后,细胞增殖活性明显降低(P＜ 0.05),TLR4抗体对此无明显拮抗作用.LPS能明显上调ECV304表达TLR4、TLR4-mRNA及IL-8mRNA,其中10 ng/mL的LPS在24 h时、50 ng/mL LPS在6~24 h时,TLR4表达具有统计学意义(P＜ 0.05);50 ng/mL的LPS刺激ECV304细胞在4 h及8 h 时,细胞核内TLR4mRNA 表达均明显升高(P ＜ 0.05),而IL-8mRNA 表达在8 h 时明显升高(P ＜ 0.05).TLR4 抗体对ECV304表达TLR4及TLR4-mRNA有拮抗作用(P＜ 0.05),对IL-8mRNA表达无明显拮抗作用(P＞ 0.05).结论:小剂量LPS可诱导ECV304细胞表达TLR4并引起细胞活化,TLR4抗体可抑制TLR4的表达,但不能抑制细胞的活化.