禽流感病毒RT-LAMP检测技术的建立

• 作者: 刘加波 庞耀珊 彭宜 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 逆转录-环介导等温扩增 禽流感病毒 检测
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 43-46
• 页数: 4页
• 分类号: S852.657
• 字数: 3016字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中禽流感病毒(AIV)M基因序列,设计针对所有亚型AIV的通用检测引物,并对反应条件进行优化,建立了检测AIV的逆转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)可视化检测方法.结果表明,建立的检测方法对禽流感病毒总RNA最小检出限为10 fg,灵敏度为RT-PCR的1 000倍,能特异地检测出所有不同的HA亚型禽流感病毒,对其他禽呼吸道病原体无扩增反应；本方法快速,在常规水浴锅或金属恒温槽中50 min就可完成,反应结束后不需开盖即可直接用肉眼根据反应液的颜色变化对结果进行判定.本研究建立的禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法具有操作简便、仪器设备要求简单、灵敏、快速、特异等优点,适合在基层进行AIV的快速早期筛检.