原代人绒毛滋养层细胞分离培养及其对巨细胞病毒的易感性研究

• 作者: 于萍 关林波 周淑 董丽群
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人绒毛滋养层细胞 人巨细胞病毒
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 344-347,377
• 分类号: R714.2
• 语种: 中文

摘要

目的 通过分离培养原代人绒毛滋养层细胞(HTCs)并检测其对人巨细胞病毒(HCMV)的易感性,探讨胎儿宫内感染HCMV的可能途径.方法 将30例健康孕妇经负压真空吸引手术所得的流产早孕绒毛组织充分剪碎,用0.25％胰蛋白酶和0.2％DNA酶混合消化法制备细胞悬液,细胞悬液经200目不锈钢筛网过滤后用Percoll液密度梯度离心对HTCs进行初步纯化,细胞传代中应用反复胰酶消化法对HTC进行3～5次纯化,通过细胞学形态观察和免疫荧光染色方法对HTCs进行鉴定；用HCMV病毒株体外感染HTCs,应用PCR、Western blot和免疫荧光方法对HCMV基因及蛋白进行检测,从而确定HTCs对HCMV的易感性.结果 Percoll分离联合胰酶、DNA酶消化法对原代HTCs有较好的分离效果,免疫荧光染色结果表明90％以上细胞表达CK-7相关抗原,HTCs体外感染HCMV 72 h后形态学发生明显改变,病毒基因及蛋白均呈阳性表达.结论 原代HTCs对HCMV易感,通过HTCs感染胎儿可能是HCMV宫内感染的重要传播途径之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周淑	四川大学华西第二医院妇产科	30	173	7.0	12.0
2	于萍	四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院细胞与基因治疗实验室	15	353	5.0	15.0
4	董丽群	四川大学华西第二医院儿科	20	107	5.0	9.0
5	关林波	四川大学华西第二医院西部妇幼医学研究院细胞与基因治疗实验室	5	45	4.0	5.0